RDEB-də çapıq (2023)

EB ilə əlaqəsi olmayan xoşxassəli böyümənin (desmoid şişlər) müalicəsi üçün ABŞ-da bu yaxınlarda təsdiqlənmiş bir dərman olan Niroqacestat sınaqdan keçirildi. RDEB olan insanlardan laboratoriyada yetişdirilən dəri hüceyrələrini daha sağlam etdi və EB ilə yaşayan insanlar üçün simptomları azaltmaq üçün yenidən təyin edilə bilər.

Tədqiqatçılar öz nəticələrini 2024-cü ildə Araşdırma Dermatologiyası jurnalında dərc etdilər və "Epidermoliz büllozunun müalicəsində istifadə üçün qamma-sekretaz inhibitorları" adlı patent müraciəti təqdim etdilər.

RDEB olan insanlardan dəri hüceyrələri (fibroblastlar) laboratoriyada yetişdirilir və onların istehsal etdikləri mikroRNT adlanan molekulların səviyyələri və növləri araşdırılır. Bu molekulların çapıqlara (fibroz) nəzarət etməkdə rolu onları EB müalicələri üçün hədəf halına gətirə bilər. Əlavə tədqiqat üçün dörd mikroRNT molekulu seçilmişdir, çünki onlar RDEB olan insanların hüceyrələrində daha yüksək (dörddən üçü) və ya daha aşağı səviyyədədirlər. Onların fibroz və iltihab proseslərinə təsir göstərdiyi sübut edilmişdir.

Ayrı-ayrılıqda, xərçəngin müalicəsi üçün hazırlanan bir dərmanın RDEB-də çapıqları azaltmaq üçün potensial bir terapiya olduğu göstərilmişdir.

Tədqiqatçının 2022-ci ildə təqdim etdiyi bu infoqrafika davam edən işi göstərir:

Prof Giovanna Zambruno (sağda) Dr Angelo Giuseppe Condorelli ilə Bambino Gesù Uşaq Xəstəxanasında hüceyrə mədəniyyəti otağında. Dr Condorelli laboratoriyada gündəlik olaraq layihəyə cavabdeh olan doktoranturadan sonrakı tədqiqatçıdır.

Tədqiqat rəhbəri:

Dr Giovanna Zambruno, Bambino Gesù Uşaq Xəstəxanasının məsləhətçisi, IRCCS, Roma, İtaliya

Dr. Zambruno İtaliyanın Pavia Universitetində Tibb fakültəsini bitirmişdir (1982) və 1985-ci ildə həmin Universitetdə Dermatologiya və Venerologiya üzrə rezidentura təhsilini tamamlamışdır. INSERM Dermatoloji və İmmunoloji Tədqiqatlar Laboratoriyasında və Klod Bernard Universitetinin Dermatologiya şöbəsində, Lyon, Fransada (1985-1986) tədqiqat təqaüdündən sonra Modena Universitetinin Dermatologiya kafedrasının əməkdaşı oldu və burada ilk tədqiqat qrupunu yaratdı. 1995-ci ildə o, Molekulyar və Hüceyrə Biologiyası Laboratoriyasının direktoru (1995-2015) və sonra Elmi Direktor (2017-2018) olduğu Istituto Dermopatico dell'Immacolata (IDI)-a köçdü. O, hazırda Romadakı Bambino Gesù Uşaq Xəstəxanasında məsləhətçidir və burada Patologiya və Dermatologiya Bölmələri və Genetika və Nadir Xəstəliklərin Tədqiqat Bölməsi ilə əməkdaşlıq edir. Son 25 il ərzində onun klinik və tədqiqat fəaliyyəti nadir dəri xəstəliklərinə, xüsusən də irsi epidermoliz büllozasına yönəlmişdir. O, resenziyalı jurnallarda 270-dən çox nəşrin müəllifidir, bunlardan 80-i epidermolizis bülloza ilə bağlıdır.

Birgə müstəntiqlər:

Dr Teresa Odorisio, Molekulyar və Hüceyrə Biologiyası Laboratoriyası, IDI-IRCCS, Roma, İtaliya
Əməkdaş: Professor Leena Bruckner-Tuderman, Universitätsklinikum Freiburg – Hautklinik, Almaniya

“Zədə və iltihabla əlaqəli fibroz RDEB-də daimi və mütərəqqi bir xüsusiyyətdir. O, mitten əlinin formalaşması, ekstremitələrin kontrakturaları və selikli qişaların strikturalarından məsuldur və erkən və aqressiv dəri skuamöz hüceyrəli karsinomanın inkişafında iştirak edir. Fibroza qarşı mübarizə xəstəliyin gedişatını və xəstələrin həyat keyfiyyətini yaxşılaşdırmaq strategiyasını təmsil edir. İlk dəfə olaraq, təhlillərimiz çox sayda miRNA-nın ifadə səviyyələrini və RDEB fibrozunda onların funksional rolunu araşdıracaq. miRNA analizi gələcək, innovativ anti-fibrotik terapevtik strategiyalar üçün yeni dərman vasitələrinə malik hədəfləri/yolları müəyyən etmək və ayırmaq üçün başlanğıc nöqtəsi olacaqdır.

- Doktor Giovanna Zambruno

Qrant adı: Distrofik epidermoliz bülloza fibrozunda mikroRNT-lər: ifadə profili, fəaliyyət və terapevtik perspektivlər

DNT-miz bədənimizi meydana gətirən zülalları yaratmaq üçün məlumat saxlayan genlərdən ibarətdir. DNT təlimatları bu zülalları (tərcümə) istehsal etməyə xidmət edən xəbərçi RNT (mRNA) adlanan RNT molekullarına transkripsiya edilir. Bununla belə, kodlaşdırmayan RNT adlanan bəzi RNT-lər zülallara çevrilmir, lakin istehsal olunan zülalların miqdarını tənzimləyir. MikroRNA-lar (miRNA-lar) xüsusi mRNA-larla qarşılıqlı əlaqə quraraq zülal istehsalını bloklayan kodlaşdırmayan RNT-lərdir. MiRNA-lar bütün bioloji proseslərin əsas tənzimləyiciləridir və onların anormal funksiyası bir çox xəstəliyə, o cümlədən fibrotik (çapıq) dəri pozğunluqlarına kömək edir.

Resessiv distrofik epidermoliz büllozunda (RDEB) aramsız blisterləşmə ən ağır xəstəliyin ağırlaşmalarının inkişafında mühüm rol oynayan ağır fibroza gətirib çıxarır. Qrupumuz bəzi miRNA-ların RDEB xəstələrinin (RDEBF) fibroblastlarında daha çox olduğunu və in vitro pro-fibrotik fəaliyyət göstərdiyini müşahidə etdi. Bu ilkin tədqiqatlara əsaslanaraq, hazırkı layihə RDEBF-lərdə tənzimlənməmiş əlavə miRNA-ları müəyyən etmək və onların mühüm pro-fibrotik molekulların (məsələn, transformasiya edən böyümə faktoru-b1) istehsalı və sərbəst buraxılması kimi əsas fibrotik proseslərdə rolunu xarakterizə etmək məqsədi daşıyır. Bu tədqiqat xəstəliyin patomexanizmləri haqqında bilikləri genişləndirməyə və fibrozu məhdudlaşdırmaq üçün innovativ müalicələr üçün potensial hədəflər kimi yeni miRNA və miRNA hədəflərini müəyyən etməyə kömək edəcəkdir.

DNT-miz bədənimizi meydana gətirən zülallar yaratmaq üçün məlumat saxlayan genlərdən ibarətdir. DNT təlimatları zülalların istehsalına xidmət edən xəbərçi RNT (mRNA) adlı RNT molekullarına transkripsiya edilir. Bununla belə, mikroRNT adlanan kiçik RNT ailəsi zülallara çevrilmir, istehsal olunan zülalların miqdarını tənzimləyir. MikroRNA-lar mikroRNT hədəfləri kimi müəyyən edilən xüsusi mRNA-larla qarşılıqlı əlaqədə olmaqla zülal istehsalını bloklayır. MikroRNA-lar bütün bioloji proseslərin əsas tənzimləyiciləridir və onların nasazlığı resessiv distrofik epidermoliz büllozası (RDEB) və onun dəri iltihabı, fibroz və xərçəng inkişafı kimi ağır klinik ağırlaşmaları da daxil olmaqla bir çox xəstəliyə kömək edir.

Fibrotik toxumalarda fibroblastlar həddindən artıq miqdarda “fibrotik” zülallar, əsasən də kollagenlər istehsal edir, bunlar hüceyrələrdən kənarda yığılır və ətrafdakı toxumanın daralma qabiliyyətini artırır, bu da toxuma sərtliyinə və disfunksiyaya səbəb olur. Əvvəlki araşdırmamız miR-145-5p adlı bir mikroRNT-nin RDEB xəstələrinin fibroblastlarında daha çox olduğunu göstərdi və fibrotik proseslərdə rolunu nümayiş etdirdi. Bu layihədə bir anda yüzlərlə mikroRNT-nin bolluğunu qiymətləndirdik və onların funksiyalarını araşdırmağa başladıq. RDEB fibroblastlarında tənzimlənməmiş 36 mikroRNT qrupunu müəyyən etdik (yəni, sağlam donorların hüceyrələrinə nisbətən ən azı iki dəfə çox və ya daha az bol olan molekullar). Bundan sonra, biz əlavə araşdırmalar üçün RDEB hüceyrələrində nəzarətlə müqayisədə artan və ya azalmış miqdarda mövcud olan dörd mikroRNT seçdik. Bu mikroRNT-lərin farmakoloji modulyasiyasının RDEB fibroblastları tərəfindən tipik fibrotik zülalların istehsalına qarşı çıxa bildiyini müşahidə etdik.

Paralel olaraq, Notch yolu adlı RDEB fibrozunda iştirak edən yeni müəyyən edilmiş molekulyar mexanizmlə bağlı araşdırmalarımızı dərinləşdirdik. Hüceyrə yolu, hüceyrə bölünməsi, hərəkət və ya fibroz kimi müxtəlif bioloji hadisələrə səbəb olan xüsusi molekullar (yol üzvləri adlanır) tərəfindən idarə olunan yaxşı təşkil edilmiş bir sıra hərəkətlərdən ibarətdir. Tədqiqatlarımız göstərdi ki, Notch yolunun müxtəlif yanaşmalarla, o cümlədən kommersiyada mövcud olan, lakin bu günə qədər RDEB-dən fərqli xəstəliklərin müalicəsində istifadə edilən dərmanlarla inhibə edilməsi RDEB hüceyrələrində bir neçə pro-fibrotik xüsusiyyətləri nəzərəçarpacaq dərəcədə zəiflədir. Ətraflı olaraq, Notch aktivliyini azaldan xüsusi molekullarla müalicə olunan RDEB fibroblastları azaldılmış qabiliyyət nümayiş etdirir i) kollagen gelləri daraltmaq (fibroblastların ətrafdakı toxumaları daraltmaq qabiliyyətinin modelini təmsil edir), ii) "lifli" zülalları yerləşdirmək. (kollagenlər) hüceyrədən kənarda, iii) ən mühüm fibrotik molekulu, yəni transformasiya edən böyümə faktorubeta1 ifraz etmək, iv) hərəkət etmək və çoxalmaq və (v) fibrotik toxumalarda adətən bol olan geniş çeşiddə molekullar istehsal etmək. Birlikdə götürdükdə, məlumatlarımız RDEB ilə əlaqəli xəstəlik proseslərində Notch yolunun bioloji uyğunluğunu və dəri fibrozunun qarşısını almaq üçün yenilikçi bir terapevtik hədəf kimi inhibəsini dəstəkləyir. (2022-ci il tərəqqi hesabatından).

Genetik materialımız (DNT və RNT ardıcıllığı) zülallar və fermentlər daxil olmaqla, bütün bədən komponentlərini meydana gətirmək və hər hansı bir həyati prosesi həyata keçirmək üçün məlumatları saxlayır və ötürür. Hər bir bioloji molekulun düzgün miqdarı və aktivliyi toxuma və orqan funksionallığını təmin etmək və beləliklə, sağlam qalmaq üçün çox vacibdir. Xüsusilə, zülal bolluğu müxtəlif genetik mexanizmlər, o cümlədən mikroRNT-lərin – tənzimləyici rolu olan qısa RNT molekullarının geniş ailəsi (>2500 üzv) tərəfindən idarə olunur.

MikroRNA-lar messenger RNT (mRNA) adlanan zülal şablonlarının zülallara “keçid”ini maneə törətməklə zülal istehsalını dayandırır. Hər bir mikroRNT hüceyrədən və kontekstdən asılı olaraq mikroRNT hədəfləri kimi müəyyən edilmiş xüsusi mRNA/zülal dəstini modulyasiya edir. MikroRNA-ların nasazlığı müxtəlif xəstəliklərə, o cümlədən epidermoliz büllozasının (RDEB) resessiv distrofik formasına və onun iltihab, fibroz və xərçəng inkişafı kimi ağır klinik ağırlaşmalarına səbəb olur.

Fibrotik toxumalarda fibroblastlar adlanan əsas dermal rezident hüceyrələr həddindən artıq miqdarda zərərli “lifli” zülallar və “pro-fibrotik” molekullar istehsal edir ki, bu da dərinin sərtliyinə və fibroblast disfunksiyasına səbəb olur.

Bu işdə RDEB (RDEB-FB) olan xəstələrdən əldə edilən fibroblastlarda nizamsız olduğu aşkar edilən iki mikroRNT-nin, miR-129-1-3p və miR-210-3p-nin bioloji funksiyasını müəyyən etdik və araşdırdıq. Xüsusilə, miR-210-3p miqdarı RDEB-FB-lərdə artırıldı, miR-129-1-3p isə sağlam donorların hüceyrələri ilə müqayisədə azaldı. RDEB-FB-lərdə miR-210-3p-nin "anti-miR" ilə müəyyən edilmiş bir molekul tərəfindən farmakoloji inhibə edilməsi RDEB-FB-lərin "miqrasiya sürəti" adlanan hərəkət qabiliyyətini və pro-fibrotik zülalları sintez etmək qabiliyyətini azaldır. , oksidləşdirici stresin yaratdığı zədələrə hüceyrə reaksiyasında iştirak edən bir qrup molekul da daxil olmaqla. Fərqli təcrübələr toplusunda, miR-129-1-3p səviyyələrinin “mimik” (miR-129-1-3p-mimik) ilə müəyyən edilmiş bir molekul tərəfindən artması, pro-fibrotik fibroblastların əlaməti olan hüceyrə kontraktilliyini azaldıb və azaldıb. pro-fibrotik zülalların seçiminin ifadəsi. Bu tapıntılar miR-129-1-3p-nin anti-fibrotik rolunu və öz növbəsində onun xəstələrin fibroblastlarında aşağı tənzimlənməsinin zərərli təsirini göstərir.

Daha sonra miR-129-1-3p ilə tənzimlənən yeni pro-fibrotik zülal müəyyən etdik və təsdiq etdik, yəni miR-129-1-3p-nin aşağı səviyyələri (RDEB fibroblastlarında müşahidə etdiyimiz kimi) bu yeni miR-nin daha yüksək səviyyələrinə uyğun gəlir. -129-1-3p molekulyar hədəf.

Paralel olaraq, RDEB fibrozunda NOTCH yolu üzvlərinin pro-fibrotik rolunu təsvir edən bir araşdırmanı yekunlaşdırdıq. Ətraflı olaraq, RDEB xəstələrinin fibroblastlarında əldə etdiyimiz tapıntılar, qamma-sekretaz inhibitorları ailəsinin bir molekulu olan PF-03084014 (niroqacestat) tərəfindən NOTCH siqnal kaskadının inhibəsinin kollagenin çökməsinə qədər müxtəlif fibrotik xüsusiyyətləri nəzərəçarpacaq dərəcədə zəiflətdiyini ortaya qoydu. fibroz yaradan faktor TGF-ß1-in sekresiyası və pro-fibrotik zülalların istehsalı. Qeyd edək ki, PF-03084014 bu yaxınlarda desmoid şişlərin müalicəsi üçün FDA tərəfindən təsdiqlənib və SpringWorks Therapeutics Inc tərəfindən OgsiveoTM kimi kommersiyalaşdırılıb. Gələcəkdə bu dərman RDEB-də anti-fibrotik agent kimi istifadə üçün repurposing üçün səmərəli şəkildə istifadə edilə bilər. Nəticə olaraq, məlumatlarımız RDEB ilə əlaqəli xəstəlik proseslərində NOTCH yolunun bioloji uyğunluğunu və RDEB-də dəri fibrozuna qarşı yenilikçi bir terapevtik strategiya kimi xüsusi molekullar tərəfindən inhibəsini güclü şəkildə dəstəkləyir. (2024-cü ilin yekun hesabatından).