'Biofilmlər' EB yara iyileşmesini gecikdirir

Yaraları yuduqdan sonra biofilmə yapışmayan bakteriyaları çıxarmaq üçün steril tamponlar toxuma sızana qədər yaranın 1 sm² sahəsinə basdırıldı. Xəstələrə prosesdən əvvəl bunun diskomfort yarada biləcəyi bildirilib və əvvəlcədən razılıq verilib. Tamponların diqqətlə idarə edilməsinə və qorunmasına baxmayaraq, yaralardakı biofilmlərdə mövcud ola biləcək bakteriyaların genetik ardıcıllığını əldə etmək üçün kifayət qədər genetik material uğurla toplanmadı və ya hazırlanmadı. Bu, gözlənilməz oldu, çünki metod əvvəllər uğurlu idi. Tədqiqatçılar təkrar cəhdin lokal anesteziya və yaranın sıyrılması və ya biopsiyasını əhatə edəcəyini təklif edirlər.

DEB-li dörd nəfər və JEB-li dörd nəfər layihəyə qoşulub. İnfeksiya əlaməti olmayan və son vaxtlar antibiotiklərlə müalicə olunmayan yaralardan nümunələr götürülür. Nümunələr hamısı birlikdə analiz edilənə qədər -80C-də saxlanılır. Nəticələr bu bir illik layihənin sonunda paylaşılacaq.

Aparıcı tədqiqatçı:

Dr Josefine Hirschfeld Birmingham Universitetinin Diş Məktəbi və Xəstəxanasında dosent və fəxri məsləhətçidir. O, diş əti xəstəlikləri və neytrofillər adlanan immun hüceyrələrə və onların EB daxil olmaqla xəstəliklərdəki roluna xüsusi diqqət yetirməklə bərpaedici stomatologiyada ixtisaslaşmışdır.

Tədqiqatçılar:

Dr Hadeer İbrahim Misirdəki Süveyş Kanalı Universitetində Dermatologiya kafedrasının dosentidir və Birmingem Universitetində EB üzrə PhD dərəcəsini maliyyələşdirmək üçün yüksək rəqabətli təqaüd qazanıb, burada tədqiqatını xəstələrin həyat keyfiyyətinin yaxşılaşdırılmasına yönəldir. Müxtəlif alt tiplərin EB.

Prof Iain Chapple Klinik Elmlər İnstitutunun Tədqiqat şöbəsinin rəhbəri, Stomatologiya Məktəbinin Periodontologiya şöbəsinin rəhbəri və Birmingham Community Health Trust ilə bərpaedici stomatologiya üzrə fəxri məsləhətçidir.

Professor Adrian Heagerty, EB-yə xüsusi maraq göstərən Birmingham Universitetində Məsləhətçi Dermatoloq və Dermatologiya üzrə Fəxri Professordur. O, bir neçə fəal tədqiqat qrupuna rəhbərlik edir və University Hospitals Birmingham NHS Foundation Trust-da yarı milli EB xidmətinə rəhbərlik edir.

Dr Sarah Kuehne ağız mikrobiologiyası üzrə baş müəllim və Birmingem Universitetində Ağız Mikrobiologiyası Tədqiqat Qrupunun rəhbəridir. Onun tədqiqat qrupu professor Yan Hendersonun rəhbərlik etdiyi dünyaca məşhur Mikrobiologiya və İnfeksiya İnstitutu (IMI) ilə sıx əlaqələrə malikdir.

Əməkdaşlıq:

Dr Annika Therese Kroeger, Birmingham Universitetinin Stomatologiya Məktəbində, metagenomika və transkriptomikada geniş təcrübəyə malikdir.

Professor Moritz Kebschull, Stomatologiya Məktəbində, periodontal və peri-implant xəstəliklərin klinik xüsusiyyətlərini və molekulyar əsaslarını birləşdirən mükafat qazanmış tərcümə tədqiqatı həyata keçirdi və yeni maliyyələşdirilən NIHR Bioloji Tədqiqat Mərkəzində birgə tədqiqatçıdır.

“Biz biofilmlərin sağalmayan xroniki EB yaralarında, gənc yaralarda isə olmadığına dair ilk maraqlı kəşfimizi təsdiqləməyi hədəfləyirik. Xroniki yaralarda biofilmlərin nə qədər geniş yayıldığını, içindəki mikrobları və bunların müxtəlif EB növləri arasında fərq olub olmadığını araşdıracağıq. Bu çox vacibdir, çünki biofilmlər ənənəvi antibiotik müalicələrinə davamlıdır və onlar xroniki yaraların sağalmamasının güclü sürücüsü ola bilər.

Əhəmiyyətli odur ki, 20 ildən artıqdır tədqiq etdiyimiz ağızda olanlar (saqqız xəstəliyi) kimi biofilmlə əlaqəli xəstəliklər ənənəvi yara infeksiyalarından çox fərqli şəkildə müalicə olunur. Biofilmin özü fiziki olaraq pozulmalıdır və onların tərkibindən asılı olaraq buna nail olmaq üçün bir neçə sadə yanaşma var. Bu yanaşmalar artıq digər xəstəliklərdə də istifadə olunur və EB yarasının müalicəsi üçün potensial olaraq EB yarasının idarə edilməsini dəyişdirərək çox sürətlə uyğunlaşdırıla bilər. Bu, bizim apardığımız daha böyük tədqiqat layihəsinin bir hissəsi olacaq və belə biofilmlərin xəstənin immun sistemi ilə necə qarşılıqlı əlaqədə olduğuna dair gələcək tədqiqatlar üçün yol açacaq.

Gələcəkdə müxtəlif qeyri-invaziv anti-biofilm tədbirləri tətbiq edəcəyik, o cümlədən biofilm matrisini parçalamaq üçün agentlərin istifadəsi və aşkar edilmiş mikrobların növlərinə xas olan işıq terapiyasının istifadəsi.

- Doktor Hirschfeld

Qrant adı: EB yaralarının xronikiliyində rol oynaya bilən mikroorqanizmləri müəyyən etmək üçün yüksək həssas və spesifik gen analitik üsullarından istifadə.

EB-li xəstələrdə sağalmayan yaralar əhəmiyyətli xəstəliyə və aşağı həyat keyfiyyətinə malikdir. Fəsadlara aşağıdakılar daxildir: uzunmüddətli yara baxımı ehtiyacı, qaşınma, ağrı, dəri xərçəngi və "mitten əlləri" meydana gətirən barmaqların birləşməsi.

Biz EB blisterlərinin necə və niyə əmələ gəldiyini başa düşürük, lakin yaxşı yara baxımına baxmayaraq bəzi blisterlərin niyə aylar və ya illər ərzində sağalmadığını bilmirik. Biz inanırıq ki, əsas səbəb yara səthində “biofilmlərin” olması ola bilər.

Biofilmlər dəri kimi bir səthə yapışdırılmış və çox vaxt ənənəvi müalicələrə davamlı olan öz istehsal etdiyi selikli matrisdə yaşayan müxtəlif mikrobların aqreqatlarıdır.

Biofilmlərin yaraların sağalmasını pozduğu məlumdur və biofilmləri saxlayan yaralar tez-tez irin və iltihab/qızartı kimi infeksiya əlamətləri göstərmir. Üstəlik, biofilmlər ənənəvi yara sürtmə üsulları ilə aşkar edilə bilməz və müntəzəm yara baxımı və antibiotik istifadəsinə cavab vermir. Bununla belə, şəkərli diabet, yanıq və venoz yaralar da daxil olmaqla digər xəstəliklərdə tədqiq edilən biofilmli yaralar, yaxşılaşmış sağalma ilə nəticələnən anti-biofilm tədbirlərinə yaxşı cavab verə bilər. Müxtəlif təsvir üsullarından istifadə etməklə apardığımız ilkin tədqiqatlar ilk dəfə olaraq müxtəlif EB alt tiplərinin xroniki yaralarında biofilmlərin olduğunu göstərdi.

Bu təklif mövcud mikrobların növlərini, eləcə də EB alt tipləri arasında mümkün fərqləri aşkar etmək üçün bu biofilmlərin genetik analizi ilə müşahidə nəticələrimizi təsdiq etmək məqsədi daşıyır.

Bu, heç vaxt öyrənilməmişdir, bu, yeni texnikaların istifadəsini nəzərdə tutur və çoxşaxəli əməkdaşlıq layihəsi olacaqdır. Bu, bizə yeni müalicə üsullarını daha məqsədyönlü şəkildə inkişaf etdirməyə kömək edəcək, çünki yaraların niyə sağalmadığına dair güclü göstəricilərimiz olacaq. Bu, terapiyaya daha fərdi yanaşmaya gətirib çıxaracaq, nəticədə daha yaxşı yara idarəetmə strategiyaları əldə ediləcək və EB xəstələrində xroniki yaraların düzgün sağalmasına kömək edəcək.

Nümunələrin toplanması prosesindəyik. Kəskin/xroniki yaraları olan və infeksiya əlamətləri olmayan və son vaxtlar antibiotiklərlə müalicə olunmayan EB olan xəstələrdən nümunələr toplanır. Biz distrofik EB (DEB) olan 5 və qovşaq EB (JEB) olan ən azı 3 xəstədən nümunələr toplamağı hədəfləyirik. Bu nadir dəri vəziyyətindən nümunələrin toplanması çətin məsələdir və bizim daxiletmə/istisna meyarlarımız tətbiq edilməlidir. Ancaq indiyə qədər 4 DEB və 4 JEB xəstəsini işə götürə bildik. Bütün nümunələr toplandıqdan sonra nümunələr sonrakı emal üçün -80C dondurucuda saxlanılır. (Aprel 2024-cü il tərəqqi hesabatından.)

EB-li xəstələrdə sağalmayan yaralar əhəmiyyətli xəstəliyə və aşağı həyat keyfiyyətinə malikdir. Fəsadlara aşağıdakılar daxildir: uzunmüddətli yara baxımı ehtiyacı, qaşınma, ağrı, dəri xərçəngi və "mitten əlləri" meydana gətirən barmaqların birləşməsi. Biz EB blisterlərinin necə və niyə əmələ gəldiyini başa düşürük, lakin yaxşı yara baxımına baxmayaraq bəzi blisterlərin niyə aylar və ya illər ərzində sağalmadığını bilmirik. Biz inanırıq ki, əsas səbəb yara səthində “biofilmlərin” olması ola bilər.

Biofilmlər dəri kimi bir səthə yapışdırılmış və çox vaxt ənənəvi müalicələrə davamlı olan öz istehsal etdiyi selikli matrisdə yaşayan müxtəlif mikrobların aqreqatlarıdır. Biofilmlərin yaraların sağalmasını pozduğu məlumdur və biofilmləri saxlayan yaralar tez-tez irin və iltihab/qızarıq kimi infeksiya əlamətləri göstərmir. Üstəlik, biofilmlər ənənəvi yara sürtmə üsulları ilə aşkar edilə bilməz və müntəzəm yara baxımı və antibiotik istifadəsinə cavab vermir. Bununla belə, şəkərli diabet, yanıq və venoz yaralar da daxil olmaqla digər xəstəliklərdə tədqiq edilən biofilmli yaralar, yaxşılaşmış sağalma ilə nəticələnən anti-biofilm tədbirlərinə yaxşı cavab verə bilər.

Biz biofilmlərin sağalmayan xroniki EB yaralarında mövcud olduğunu, gənc yaralarda isə o qədər də yaygın olmadığını ilkin maraqlı kəşfimizi təsdiqləməyi hədəflədik. Biz biofilmlərin xroniki yaralarda nə qədər geniş yayıldığını, içindəki mikrobları və bunların müxtəlif EB növləri arasında fərqlənib-fərqlənmədiyini araşdırmağı məqsəd qoyduq. Bu çox vacibdir, çünki biofilmlər ənənəvi antibiotik müalicələrinə davamlıdır və onlar xroniki yaraların sağalmamasının güclü sürücüsü ola bilər. Əhəmiyyətli odur ki, 20 ildən artıqdır tədqiq etdiyimiz ağızda olanlar (saqqız xəstəliyi) kimi biofilmlə əlaqəli xəstəliklər ənənəvi yara infeksiyalarından çox fərqli şəkildə müalicə olunur. Biofilmin özü fiziki olaraq pozulmalıdır və onların tərkibindən asılı olaraq buna nail olmaq üçün bir neçə sadə yanaşma var. Bu yanaşmalar artıq digər xəstəliklərdə də istifadə olunur və EB yarasının müalicəsi üçün potensial olaraq EB yarasının idarə edilməsini dəyişdirərək çox sürətlə uyğunlaşdırıla bilər. Bu, bizim apardığımız daha böyük tədqiqat layihəsinin bir hissəsidir və bu cür biofilmlərin xəstənin immun sistemi ilə necə qarşılıqlı əlaqədə olduğuna dair əlavə araşdırmalar üçün yol açır.

Həm Solihull, həm də Birmingem stomatoloji xəstəxanasında, Birmingem, Böyük Britaniyada müntəzəm tibbi xidmətin bir hissəsi olaraq iştirak edən EB olan insanlar işə götürüldü. İşə qəbul edilən xəstələr aşağıdakı meyarlara əsasən seçiliblər: 18 yaşdan yuxarı xroniki xəstəlikləri olmayan, immuniteti zəif olmayan və nümunə toplanmasından ən azı 2 həftə əvvəl yerli və ya sistemli antibiotiklər qəbul etməmiş və xroniki və ya 3 aydan az davam edən infeksiya əlamətləri göstərməyən yaraları, məsələn, irin, qızartı və ya iltihabı olanlar. Nəzarət olaraq kəskin olanlara bənzəyən 2 həftə. Tədqiqat etikasının təsdiqinə uyğun olaraq məlumatlı yazılı razılıq alındıqdan sonra üzən bakteriyalardan xilas olmaq üçün yaralar steril salin ilə suvarıldı. Sonra toxuma sızana qədər təzyiqlə 1 sm2 sahədən nümunə götürərək yara səthindən nümunə almaq üçün steril tampondan istifadə edilmişdir. Xəstələrə bunun narahatlıq yarada biləcəyi barədə əvvəlcədən xəbərdarlıq edilmişdir. Bununla belə, təmsilçi nümunə əldə etmək vacib idi. Sonra tampon genetik materialı saxlayan maye ilə steril boruya yerləşdirildi, quru buzdan ibarət soyuq mühitdə ötürüldü və sonradan emal olunana qədər -80C dondurucuda saxlanılmaq üçün həmin gün laboratoriyaya daşındı. Nümunələrin işlənməsi üçün tamponlar tədricən əridildi, istehsalçının protokoluna uyğun olaraq dəstdən istifadə edərək RNT çıxarılması üçün hazırlanmışdır. Çıxarılan RNT daha sonra analiz və kitabxananın hazırlanması üçün çox az hüceyrə miqdarı səbəbindən ondan məlumat ala bilməyən və qeyri-invaziv yara nümunəsi metodumuzla toplanmış genetik materialı ehtiva edən bir şirkətə göndərildi. Daha sonra nümunələr geri götürüldü və mütəxəssisləri ilə nümunələrimizin təbiəti ilə bağlı uzun müzakirələrdən sonra başqa şirkətə göndərildi. Təəssüf ki, ikinci şirkət də məlumat əldə edə bilmədi.

Bu nəticə gözlənilməz idi, çünki istifadə edilən dəstlər və nümunə toplama alətləri bu cür məlumatların əldə edilməsi üçün istifadə edilmişdir və komandamız RNT hasilatı üçün əvvəlki oxşar layihələr vasitəsilə əldə edilmiş onlardan istifadədə yaxşı təcrübəyə malikdir. Bundan əlavə, yaraların mikrobiomu haqqında məlumat toplamaq üçün oxşar üsullar digər tədqiqatçılar tərəfindən də istifadə edilmişdir. Gələcək tədqiqatlar üçün bu tədqiqat sualını irəli aparmaq üçün yara səthi nümunəsinin toplanması üçün alternativ olaraq yara biyopsiləri və ya yara tamponları yerinə ehtiyatla yara sıyrılması tövsiyə olunur. Bu, EB-dən təsirlənən insanlar üçün bu proseduru daha rahat etmək üçün bir növ lokal anesteziya tələb edə bilər. Tədqiqat sualı və fərziyyə hələ də etibarlıdır və nəticəyə çatmaq EB yaralarını görmə tərzimizi yönləndirmək və sağalma prosesini sürətləndirə, ağrı, qaşınma və çapıq, kontraktura, deformasiya və dəri xərçəngi kimi uzun müddətli fəsadlar kimi yaraların xronikiliyini minimuma endirə biləcək düzgün idarəetmə planının hazırlanmasında faydalı olardı. (2025-ci ilin yekun hesabatından.)