Bu veb saytda çerezlərdən istifadə edir ki, mümkün olan ən yaxşı istifadəçi təcrübəsini təmin edə bilərik. Cookie məlumatları brauzerinizdə saxlanılır və veb saytımıza qayıtdıqda və sizi maraqlandıran və faydalı olan saytın hansı bölmələrini anlamaqda kömək etmək üçün sizi tanıdığınız funksiyaları yerinə yetirir.
JEB-də hava yolu xəstəliklərini anlamaq (2023)
Birləşən EB olan bəzi uşaqlarda ciddi tənəffüs problemləri var. Bu, tənəffüs yollarını məhdudlaşdıran qabarcıqlar və yaralar nəticəsində yaranan çapıqlardan qaynaqlanır. Hazırkı müalicə daha çox çapıqlara səbəb olan bir balonla hava yolunu genişləndirməkdir. Bu layihə zədələnmiş hüceyrələri xəstənin öz hüceyrələrindən alınan xüsusi dəri ilə əvəz etməklə müalicədə inqilab yarada bilər.
Dr Colin Butler, Böyük Britaniyanın London şəhərindəki Great Ormond Street Xəstəxanasında tənəffüs yollarını zədələyən və nəfəs almağı çətinləşdirən qovşaq epidermoliz büllozası (JEB) olan uşaqlarla işləyir. Onun işi dəri və tənəffüs yollarının astarını gücləndirən və JEB ilə əziyyət çəkən bir çox ailədə pozulan laminin adlı bir zülal üzərindədir. Bu tədqiqatın məqsədi tənəffüs yollarının selikli qişasının kiçik nümunələrinin bədəndən çıxarılması, onların öyrənilməsi üçün böyüdülməsi və qırılan laminin genini düzəltməyə çalışmaqdır. Əgər işə yararsa, bir gün xəstələrin daha asan nəfəs almasına kömək etmək üçün işləyən hava yolu astarını geri qoymaq potensialı olacaq.
Maliyyələşdirməmiz haqqında
Tədqiqat rəhbəri | Dr Colin Butler |
Müəssisə | Great Ormond Street Xəstəxanası (GOSH), London, Böyük Britaniya |
EB növləri | JEB |
Xəstə cəlb | Heç biri. Bu, laboratoriya və biopsiya nümunələrində yetişdirilən hüceyrələr üzərində preklinik işdir |
Maliyyələşdirmə məbləği | DEBRA Avstriya və Cure EB-nin birgə maliyyəsi ilə £135,337.56 |
Layihənin uzunluğu | 2 il |
Başlanğıc tarixi | yanvar 2021 |
DEBRA daxili ID | Uşak 1 |
Proje detayları
Tənəffüs yolu simptomları olan on altı körpənin genetik testləri onların on üçündə JEB, ikisində EBS və birində RDEB olduğunu göstərdi. Xüsusi bir laminin geni (LAMA3) xəstələrin onunda genetik dəyişikliklərə malik idi və bu, tənəffüs yollarının digər EB növləri ilə təsirlənə bilsə də, genetik dəyişiklik LAMA3-də olarsa, bu simptomun daha çox ehtimal olunduğunu göstərir. Laminin genlərindəki genetik dəyişikliklər laminin zülalının yaranmasının qarşısını alır və JEB simptomlarına səbəb olur, çünki onsuz dəri hüceyrələri düzgün şəkildə yapışa bilmir.
Dörd xəstədən alınan hava yolu biopsiyaları laboratoriyada "hava yolu EB" hüceyrələrini yetişdirmək üçün istifadə edilmişdir. Tədqiqatçılar LAMA3 genindən hazırlanan laminin zülalını itirdiklərini göstərdilər. EB olmayan insanların hüceyrələri ilə müqayisədə 'hava yolu EB' hüceyrələri hüceyrə mədəniyyəti qabına yapışmaqda daha az yaxşı idi. Gen terapiyası işləyən LAMA3 genini 'hava yolu EB' hüceyrələrinə yerləşdirmək üçün hazırlanmışdır. Hüceyrələr yeni gendən zülal hazırlamağa başlayanda, hüceyrə mədəniyyəti qabına yapışmaqda qeyri-EB hüceyrələr qədər yaxşı oldular.
Gələcəkdə bu hüceyrələri cərrahların EB xəstələrində zədələnmiş hava yolunun hissələrini əvəz etmək üçün istifadə edə biləcək şəkildə böyütmək lazımdır. Bunun mümkün olduğunu təsdiqləmək üçün tədqiqatçılar 3D çap edilmiş dəstəklərdən istifadə edərək hava yolu hüceyrələrini greftlərə çevirmək və uğurla transplantasiya etmək üçün bir model üzərində təcrübə keçirdilər.
Bu gen terapiyası EB tənəffüs yolu simptomları olan insanlara kömək etməzdən əvvəl əlavə optimallaşdırma tələb edir, lakin bu araşdırma göstərir ki, bu cür müalicə mümkündür.
Bu işin nəticələri 2024-cü ildə dərc edilmişdir: Vəhşi tipli LAMA3A-nın lentiviral ifadəsi epidermoliz büllozası olan uşaqların tənəffüs yollarının bazal hüceyrələrində hüceyrə yapışmasını bərpa edir. və bir şərh məqaləsində təsvir edilmişdir: LAMA3 və LAMB3: Epidermoliz bülloza üçün yeni bir gen terapiyası. İş epidermolysisbullosanews.com tərəfindən də sadə dildə yazılan məqalədə işıqlandırılıb: Hüceyrə və gen terapiyası yanaşması EB uşaqları üçün vəd edir.
Xəstənin biopsiyalarından yetişdirilən hüceyrələrə işləyən laminin genlərini müvəffəqiyyətlə yerləşdirmək üçün geni dəyişdirilmiş virusdan istifadə edilmişdir. Yeni geni mümkün qədər çox hüceyrəyə daxil etməyin ən yaxşı yolunu tapmaq üçün bu proses təkrarlandı və təkmilləşdirildi. Tədqiqatçılar bu müalicədən sonra xəstə hüceyrələrində laminin zülalının hazırlandığını və hüceyrələrin bir-birinə daha yaxşı yapışdığını göstərə bilərlər.
Protein təbəqələri hazırlanmış və dəri hüceyrələrinin bir təbəqəsinin böyüməsi üçün uyğun olduğu göstərilmişdir. Bu proses hüceyrələrin sağ qalıb-qalmadığını yoxlamaq üçün sınaqdan keçiriləcək bir greft yarada bilər. Əgər işə yarayarsa, xəstələrin öz müalicə olunan hüceyrələrindən greftlər yaradıla bilər.
Tədqiqat rəhbəri:
Cənab Colin Butler, Pediatrik KBB əməkdaşı / Fəxri baş müəllim, UCL Great Ormond Street Uşaq Sağlamlığı İnstitutu, London
Colin Butler, Great Ormond Street Xəstəxanasında Qulaq Burun Boğaz Klinisyenidir və əhəmiyyətli tənəffüs yolları problemləri olan uşaqların müalicəsinə xüsusi maraq göstərir. O, bu sahədə cərrahi təqaüd götürüb və dərinin tənəffüs yoluna köçürülməsi təcrübəsi var. O, indi tənəffüs yollarına təsir edən EB olan uşaqları müalicə edən komandanın bir hissəsidir. Onun fəlsəfə doktoru regenerativ tibb sahəsində olub və yetkin hava yolu kök hüceyrələrini tənəffüs yolu üçün epitelial müalicələrə doğru genişləndirmək yolunu araşdıran "Welcome" təqaüdünə layiq görülüb. O, hava yolu sahəsində geniş məqalələr dərc edib və “dəzgahdan çarpayıya qədər” məhsulların hazırlanmasında təcrübəyə malikdir.
Müraciət edənlər:
UCL-in Tənəffüs Tədqiqatları Departamentinin rəhbəri professor Sam Janes; Professor Paolo De Coppi, UCL-nin neonatal mütəxəssisi – əməkdaşlıqda: Dr Gabriela Petrof, Dr Anna Martinez, cənab Richard Hewitt (Uşaq Otolarinqoloqu Qulaq Burun və Boğaz GOSH)
“Tənəffüs yollarına təsir edən EB nadir bir hadisədir, lakin təsirlənənlər üçün bu vəziyyət çapıqlar səbəbindən ciddi tənəffüs problemlərinə səbəb olur. Təsirə məruz qalanların tənəffüs boruları o qədər kiçikdir ki, bu, samanla nəfəs almağa bənzəyir. Klinik seçimlər ciddi şəkildə məhduddur, daralmış tənəffüs yollarını həll etməyin yeganə yolu hava yolunu bir balonla genişləndirməkdir. Genişlənmə dərhal daralmanı yüngülləşdirməyə kömək edə bilsə də, əlavə travma əlavə çapıqlara səbəb olur. Bu tədqiqatın məqsədi bu prosesi başa düşmək və onun müalicə üsullarını inkişaf etdirməkdir, xüsusən də tənəffüs yolu üçün xüsusi dərinin böyüməsinin yeni yollarını inkişaf etdirərək. Ümid odur ki, hava yolu ilə mübarizə aparmaqla, oxşar üsullardan istifadə edərək digər sahələr də hədəf alına bilər. Xəstənin öz hüceyrələrindən hazırlanan implantasiya edilə bilən tənəffüs yollarının selikli qişası ilə tənəffüs yollarının çapıqlarını müalicə edə bilmək bu xəstəliyin müalicə üsulunu həqiqətən dəyişdirərdi.
- Doktor Kolin Batler
Qrant adı: Birləşmiş epidermoliz bülloza (JEB) olan uşaqlarda tənəffüs simptomlarının yaxşılaşdırılması üçün birləşmiş tənəffüs epitel hüceyrəsi və gen terapiyası
Epidermoliz büllozası (EB) xəstələrin minimal travma ilə ağrılı qabarcıqlar və çapıqlar əmələ gətirən olduqca kövrək səth toxumalarından əziyyət çəkən genetik bir xəstəlikdir. Əsasən xarici dəriyə təsir edir, lakin səs qutusu və nəfəs borusu da əhəmiyyətli dərəcədə təsirlənə bilər. Tənəffüs yolu EB-nin müalicə variantları çox məhduddur və tez-tez təsirlənən şəxslər udmaqda çətinlik çəkəcəklər və tənəffüs yollarının çapıqlanmasından pisləşən nəfəs almaqda çətinlik çəkə bilərlər. Tənəffüs yollarının son tıxanması tənəffüs yolunun açılmasına kömək edən tibbi prosedur olan traxeostomiyaya ehtiyac yaradır. Bu sahədə aparılan tədqiqatlar müəyyən etmişdir ki, tənəffüs yollarında dəri greftləri EB-də tənəffüs yolu xəstəliklərinin potensial müalicəsini təmin etmək üçün genlə düzəldilmiş hava yolu hüceyrələrinin çatdırılma imkanını təmin edə bilər.
Bu layihədə diqqət mərkəzində olacaq gen laminin zülalından məsul olan LAMA3 genidir. Bu zülal tənəffüs yollarında olan dəri və digər toxumalara güc vermək üçün hüceyrələrin bir-birinə bağlanmasına kömək etmək, həmçinin yaraların sağalma prosesində iştirak etmək üçün vacibdir. Buradakı iş, gen əsaslı terapiyanın EB-dən təsirlənən tənəffüs yollarının astarını düzəltməyə kömək edə biləcəyini tapmaq məqsədi daşıyır. Hüceyrələr tənəffüs yolundan istifadə ediləcək və LAMA geni daha sonra bədəndən kənarda düzəldiləcək və bu texnikanın tənəffüs yolu xəstəliklərini dayandırmaq üçün işləyəcəyini görmək üçün yenidən tətbiq ediləcək.
Bu layihənin 3 əsas məqsədi EB hava yolu xəstəliyini modelləşdirmək üçün laboratoriya əsaslı alətlər təqdim etmək, həmçinin EB-dən təsirlənmiş tənəffüs yollarının astarını düzəltmək üçün gen redaktə vasitələrindən istifadə etməkdir.:
Məqsəd 1: Birləşən EB-də tənəffüs yollarında təsirlənən epitel (toxumalar) haqqında daha dərindən başa düşmək;
Məqsəd 2: Viral vektorlardan istifadə edərək LAMA3 geninin korreksiyası üçün potensial üsulların yaradılması, (korreksiya edilmiş geni çatdırmaq üçün istifadə olunan viruslar);
Məqsəd 3: Canlı modeldə LAMA3 geni ilə düzəldilmiş müalicənin necə qəbul edildiyini görmək üçün test edin.
Bu ümumi məqsədlər EB tənəffüs yolu xəstəliyi üçün gen redaktorlu müalicələrə dair pilot və ya ilkin məlumatların təmin edilməsinə kömək etmək və həmçinin fərdiləşdirilmiş tibb strategiyalarının inkişafı üçün ilkin hüceyrə xətlərinin nadir resursunu (elmi anlayışı inkişaf etdirmək üçün xüsusi hüceyrələr) yaratmaqdır.
Bu tədqiqat həmçinin bədənin digər toxumalarına, o cümlədən buynuz qişa (göz) epiteli və həzm traktının selikli qişalarına (burun, dodaqlar, ağız, dil, boğaz, səs telləri və yuxarı) təsir edən EB formalarını düzəltmək imkanını aça bilər. yemək borusu və nəfəs borusunun bir hissəsi).
Bu texnikadan istifadə edərək EB-də tənəffüs yolu xəstəlikləri üçün hüceyrə xətləri yaratmaq bacarığı, kiçik molekulyar birləşmələrin kütləvi skrininqi üçün fərdiləşdirilmiş dərman testi perspektivini açacaqdır. Bu, bu araşdırmadan toplanan məlumatlardan istifadə edərək bir şəxs üçün xüsusi bir müalicə tapmaq deməkdir.
Epidermoliz bülloza (EB) nadir genetik dəri xəstəlikləri qrupudur və dərinin müxtəlif təbəqələrində blister əmələ gəlməsi ilə toxuma ayrılmasını ehtiva edir. Birləşən EB adlanan daha ağır EB tipində bəzi təsirlənmiş xəstələrdə dəri lezyonlarına əlavə olaraq tənəffüs yollarında problemlər yaranır. Yuxarı tənəffüs yollarında blister əmələ gəlməsi, sonra çapıqlaşma və qalınlaşma əmələ gəlir və bu, tənəffüs yollarını maneə törədir. Hətta maneə törədən toxumalar çıxarıldıqdan sonra da zədələnmiş tənəffüs yolu təkrarlanan infeksiyaya görə əlavə zədələrə məruz qalır və nəticədə müalicə olunmayan hava yollarının stenozuna gətirib çıxarır. Tənəffüs yollarının tutulması olan EB xəstələrinin yüksək ölüm nisbəti bizi müalicəni inkişaf etdirməyə sövq etdi. Great Ormond Street Xəstəxanasındakı xəstə kohortumuzda tənəffüs yollarının tutulması olan EB xəstələrinin əsasən LAMA3 adlı gendə DNT mutasiyalarını daşıdığını müəyyən etdik. Qrupumuz laboratoriya şəraitində xəstələrin tənəffüs yollarının hüceyrələrini çıxarıb böyütmüşdür. LAMA3 DNT-nin funksional surəti bu hüceyrələrin genomuna daxil edilib. Nəticələrimiz göstərdi ki, bu gen terapiyası normal fərdlərin hüceyrələri ilə müqayisədə EB xəstə hüceyrələrini normal funksiyaya qaytara bilər. Layihəmizin növbəti addımı gen terapiyası metodunun effektivliyinin artırılması və gen korreksiyası edilmiş hüceyrələrin yuxarı tənəffüs yollarına çatdırılması üçün cərrahi metodun optimallaşdırılması olacaq. (2022-ci il tərəqqi hesabatından).
London Universitet Kolleci və Uşaqlar üçün Great Ormond Street Xəstəxanasının (GOSH) tədqiqatçıları yuxarı tənəffüs yollarında çətinliklərdən əziyyət çəkən EB xəstələrinin həyatını yaxşılaşdıran layihələrinə görə DEBRA tərəfindən maliyyələşdirilib.
Tədqiqatlarının birinci mərhələsində elm adamları GOSH-un Qulaq, Burun və Boğaz şöbəsinə göndərilən EB xəstələrinin xüsusi ehtiyaclarını başa düşməyə diqqət yetirdilər. Tədqiqata müraciət zamanı orta yaşı 15 aydan bir qədər çox olan həm kişi, həm də qadın 9 xəstə daxil edilmişdir. Bu xəstələr arasında müxtəlif EB alt tipləri müəyyən edilmişdir ki, bunlardan ən çox yayılanı Junctional Epidermolysis Bullosa-Simplex (JEB-S) olmuşdur. Bu xəstə qrupunun genetik analizi, 14 xəstədən doqquzunda bir spesifik gendə, LAMA3-də patogen variantlara malik olduğunu ortaya qoydu və bu genin tənəffüs yollarında problemlərə yol açmağa xüsusi meyli olduğunu göstərir.
Tədqiqat qrupu 'hava yolu EB'si olan dörd xəstənin tənəffüs yolu biopsiyalarından hüceyrə kulturalarını müvəffəqiyyətlə qurdu və laboratoriyada hüceyrələri öyrənməyə imkan verdi. Onlar mədəniyyətdəki hüceyrələrdə LAMA3 geninin və zülal ifadəsinin çatışmazlığının olduğunu və hüceyrələrin plastik mədəniyyət qablarına, eləcə də qeyri-EB donorlarının hüceyrələrinə yapışmadığını aşkar etdilər. Bu, hüceyrə əsaslı modelin tənəffüs yollarının EB-nin daha da öyrənilməsi üçün faydalı olduğunu və potensial müalicələri sınaqdan keçirmək üçün istifadə oluna biləcəyini göstərir.
Məqsəd 1-dən əldə edilən fikirlərə əsaslanaraq, tədqiqat qrupu daha sonra LAMA3-ü hüceyrə mədəniyyətində yetişdirilmiş hava yolu epitel hüceyrələrinə çatdırmaq üçün lentiviral vektorlar hazırladı. LAMA3 vektorunun hava yolu EB xəstə hüceyrələrinə tətbiqi LAMA3 RNT və zülal ifadəsində əhəmiyyətli artıma səbəb oldu. Ən əsası, düzəldilmiş tənəffüs yolu EB xəstə hava yolu hüceyrələri təkmilləşdirilmiş hüceyrə əlavəsi nümayiş etdirdi və qeyri-EB donor hüceyrələri ilə müqayisə oluna bildi. Bu kəşf, LAMA3 ifadəsinin terapevtik korreksiyasının bəzi hava yolu EB xəstələri üçün hüceyrə yapışma qüsurlarını potensial olaraq həll edə biləcəyini göstərir.
Tədqiqatı bir addım daha irəli aparmaq üçün elm adamları düzəldilmiş hüceyrələri mədəniyyətdən götürüb hava yollarına köçürə bilməlidirlər. Bununla belə, dəri transplantasiyasından fərqli olaraq, tənəffüs yollarını patentləşdirərkən bunun baş verməsinə imkan verən cərrahi üsul hazırda mövcud deyil. Beləliklə, komanda cərrahiyyə modelindən istifadə edərək sınaqdan keçirilmiş epitelial hüceyrə enraftmentini sınaqdan keçirdi. Onlar tənəffüs yollarının bazal hüceyrələrini təcrid etdilər və onları əvvəllər EB xəstələri üçün istifadə edilənlərə bənzər hüceyrə mədəniyyəti şəraitində böyüdülər, sonra traxeya epitelial hüceyrə transplantlarını dəstəkləmək üçün nəzərdə tutulmuş fərdiləşdirilmiş 3D çap stentləri inkişaf etdirdilər. Cərrahi əməliyyatdan sonrakı analizlər mədəni hüceyrələrin müvəffəqiyyətlə aşılandığını aşkar etdi. Əhəmiyyətli olan odur ki, bu, ex vivo-manipulyasiya edilmiş otoloji hüceyrələrin transplantasiyadan sonra klinik cəhətdən uyğun şəraitdə inkişaf etmə potensialına qapı açır.
Bu tədqiqatın nəticələri ümid edir ki, gələcəkdə EB-nin tənəffüs yolları təzahürləri olan xəstələr üçün yeni bir həll yaratmaq üçün hüceyrə terapiyası və gen terapiyasını birləşdirmək mümkün olacaq. Tənəffüs yollarının EB-nin genetik əsaslarının başa düşülməsində, gen-korreksiya üsullarının işlənib hazırlanmasında və cərrahi olaraq insanlara oxşar olan heyvan modelində mədəni hüceyrələrin uğurla həkk olunmasında əldə edilən irəliləyiş transformativ müalicələrin potensialını vurğulayır. Bu işdə növbəti addımlar lentiviral vektorları xəstələrdə istifadə üçün uyğunlaşdırmaq və hüceyrə transplantasiyasının səmərəliliyini və təkrar istehsalını daha da optimallaşdırmaq olacaq.